武汉阳达生物科技有限公司供应武汉氟喹诺酮类(FQNs)ELISA试剂盒
氟喹诺酮类(FQNs)ELISA试剂盒使用说明
一、概要
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被氟喹诺酮类抗原,样品中残留的氟喹诺酮类药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗氟喹诺酮类抗体,加入酶标二抗后,经TMB底物显色,样品的吸光值与其残留物氟喹诺酮类药物的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中残留物氟喹诺酮类药物的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测肌肉、肝脏等样品中氟喹诺酮类的残留量。
四、氟喹诺酮类药物交叉反应率
环丙沙星 (CIF) ……………………………………100 %
恩诺沙星 (ENR) ……………………………………150 %
依诺沙星 (ENO) ………………………………………85 %
氧氟沙星 (OFL) ………………………………………91 %
诺氟沙星 (NOR) ………………………………………90%
培氟沙星 (PEF) ………………………………………61 %
达氟沙星 (DAN) ……………………………………135 %
洛美沙星 (LOM) ………………………………………73 %
氟啶酸沙星 (ENX) …………………………………110 %
沙拉沙星 (SAR) ………………………………………147%
双氟沙星 (DIF) ………………………………………50 %
氨氟沙星 (AMI) ………………………………………75%
麻保沙星 (MAR) ………………………………………87%
四、检测步骤
操作步骤:
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)回温30min以上,注意每种液体试剂使用前均需轻轻摇匀。
2、取出所需数量的微孔板,将不用的微孔放入带有干燥剂的锡箔袋中,保存于2~8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样品和标准品对应微孔按序编号,每个样品和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样品孔所在的位置。
5、加标准品/样品:加标准品/样品50ml/孔到对应的微孔中,然后加入抗试剂50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液250ml/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10~20s,用吸水纸拍干(拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、加酶标物:加入酶标物100ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min,取出重复洗板步骤6。
8、显色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15~20min。(如颜色较浅可适当延长此步的反应时间)
9、测定:加入终止液50ml/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
六、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度:0.5ppb
氟喹诺酮类药物检测下限:
环丙沙星 (CIF) 检测下限 ……………………… 1ppb
恩诺沙星 (ENR) 检测下限…………………… 约 1ppb
依诺沙星 (ENO) 检测下限 …………………… 约2ppb
氧氟沙星 (OFL) 检测下限 …………………… 约2ppb
诺氟沙星 (NOR) 检测下限 …………………… 约2ppb
培氟沙星 (PEF) 检测下限 …………………… 约2ppb
达氟沙星 (DAN) 检测下限 …………………… 约1ppb
洛美沙星 (LOM) 检测下限 …………………… 约2ppb
氟啶酸 (ENX) 检测下限 ……………………… 约1ppb
沙拉沙星 (SAR)检测下限………………………约 1ppb
双氟沙星 (DIF)检测下限………………………约2ppb
氨氟沙星 (AMI)检测下限…………………………约2ppb
麻保沙星 (MAR)检测下限…………………………约2ppb
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
本公司地址:湖北武汉东湖新技术开发区东信路光谷创业街10栋